小鼠xiao喘模型
造模方法
致敏:小鼠在清洁级实验动物房适应性饲养1周,于造模当天、第8天经腹腔无菌注she抗原液0.2 ml
激发:第二周,每日上午8~10时将小鼠置于自制密闭雾化箱中,给予含10mg/ml卵清蛋白溶液超声雾化吸入(现配现用),每日1次,每次30min以激发xiao喘,连续激发14-21 d。成功的模型表现:小鼠出现烦躁不安,进而呼吸加快、加深,静伏不动、弓背,严重者伸颈、缩胸、收缩呈喘xi状,甚至大小便失禁等。分别不zhu射,皮下zhu射生理盐水,尼古丁1mg/kg,3mg/kg和6mg/kg,3次/d,连续7d。
造模照片
模型图片
实验动物的分组
(一)分组的原则:进行动物实验时,经常需要将选择好的实验动物按研究的需要分成若干组。动物分组应按随机分配的原则,使每只动物都有同等机会被分配到各个实验组与对照组中去,以避免各组之间的差别,影响实验结果,特别是进行准确的统计检验,必须在随机分组的基础上进行。6、心脏采血:将动物,使其仰位固定,剪去胸前区毛,消毒皮肤,在左侧第3—4肋间选择心博强处穿刺,血液借心脏跳动的力量进入。
每组动物数量应按实验周期长短、实验类型及统计学要求而定。如果是慢性实验或需要定期处死动物进行检验的实验,就要求选较多的动物,以补足动物自然和认为处死所丧失的数量,确保实验结束时有合乎统计学要求的动物数量存在。
(二)建立对照组:分组时应建立对照组。1.自身对照组:是指实验数据而言。实验动物本身在实验处理前、后两个阶段的各项相关数据就分别是对照组和实验组的实验结果,此法可排除生物间的个体差异。2.平行对照组:有正对照组和负对照组两种。给实验组动物某种处理,而给正对照组用同样方法进行处理,但并不采用实验所要求的或手段,负对照组则不给任何处理。3.具体分组时,应避免人为因素, 随机把所有的动物进行编号,然后令其双数为A组(实验组),单数为B组(对照组)即可或反之。相反,大小白鼠、地鼠和豚鼠结扎冠脉的后果就比较稳定一致,可以预测,因而可以标准化。如果要分若干个组时,应该用随机数字表示进行完全随机分组。
小鼠膀胱ai原位瘤动物模型建立方法
膀胱灌注法通常采用对数生长期的MB49小鼠膀胱ai细胞株作为实验材料,6-12周龄的雌性C57/BL6小鼠作为实验动物。- -般膀胱内灌注数量为:10^4-5*10^5个,10^4-10^5个, .5x10^6-4x10^6个。实验中常通过导管对经过膜处理后膀胱灌入细胞悬液--定时间后使细胞粘附于膀胱壁上,建立起小鼠原位膀胱ai模型。该方法简便有效,成瘤率相对较高。但是在膀胱粘膜完整的情况下,发癌率- -般只有10%。为提高其移植成功率,研究者通常采用膀胱粘膜损伤技术进行膀胱灌注。常用的膀胱损伤技术有电灼法,酸性溶液和胰蛋白酶灌注法(17-19)。24h后用yi醚浅麻zui大鼠,颈部常规消毒,打开颈前正中切口,将套在双侧颈总动脉下的备用线结扎,根据实验需要可阻断血流10?60min。该方法成瘤率高,具有很强的实用性,但是膀胱ai模型插管要求高,肿liu细胞容易外渗,并且膜损伤处理过后易发生膀胱内发炎现象。HBV模型的建立方法
(1)方法:主要使用各种技术来创建HBV病毒小鼠模型。小鼠模型可分为HBV部分片段和HBV全长或超长序列模型。
(2)模型特征HBV小鼠不受HBV的影响,不会引起免yi清除。该模型可用于观察HBV对肝细胞的直接破坏作用。含有外源启动子的HBsAg小鼠(50-4)产生大量HBsAg大包膜蛋白。这会导致很长的,有时是分支的杆状HBsAg积聚在肝细胞的内质网中,并且无法有效分泌。肝细胞显示出毛玻璃变色并损害肝细胞。小鼠中的HBV标记主要在gan脏中表达,也可以在shen脏,yi腺和外周血等qi官中表达,尤其是在1,096 bp 1.3拷贝的HBV小鼠中。xue清HBV DNA的水平相当于3x10000000至9x10000000基因组当量/毫升,相当于慢性HBVgan染者的水平。这类模型在遗传病、代谢病、缺陷病、疾病和等方面的应用正日益增多。它可以检测血液中的HBsAg,S1前和HBeAg,是用于yao物筛选的you秀模型。
(3)建立比较yao物HBV小鼠模型在HBV分子生物学和免yi学研究中,特别是在加强肝细胞HBV感ran的分子机制方面,具有重要意义。
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