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大家好,下面小编给大家分享一下。很多人还不知道已经构建的表达基因的质粒。以下是详细的解释。现在让我们来看看!
1.首先要用某种限制性内切酶切割质粒,使质粒出现一个缺口,露出粘性末端。
2.用同样的限制性内切酶切下目的基因,产生同样的粘性末端。
3.将目标基因的切割片段插入质粒的切口。第一,碱基互补配对,两个粘性末端吻合,碱基间形成氢键。
4.加入适量的DNA连接酶,催化两条DNA链之间形成磷酸二酯键,从而连接相邻的脱氧核糖核酸,形成重组DNA分子。例如,人胰岛素基因以这种方式与大肠杆菌中的质粒DNA分子结合,形成重组DNA分子。
标签:如何构建一个基因表达载体
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